PROSEDUR TETAP IN CELL ANALYZER 3000

Pendahuluan

     Prosedur ini berlaku untuk mengoperasikan mesin In Cell Analyzer 3000. In Cell Analyzer digunakan untuk skrining bahan obat baru tingkat seluler.

II. Definisi

1.      Translocation assay: area pergerakan molekul obat yang dilacak dengan menggunakan marker.

2.      Marker: molekul pelacak yang digunakan dalam translocation assay, dapat berupa Cypher, GFP, dan Hoescht 33342.

3.      Cypher: pewarna berwarna merah untuk mewarnai endosom untuk menelusuri internalisasi bahan obat dari membrane plasma ke jalur endositik.

4.      GFP: Green Fluorescent Protein, yaitu protein yang dapat berpendar dan non toksik yang diklon dari hewan laut Aequorea Victoria.

5.      Trafficking: penelusuran fungsi protein di dalam sel.

6.      Hoescht 33342: pewarna untuk nuklei yang berwarna biru.

III. Cara Kerja

1. Pastikan semua kabel dan perangkat In Cell Analyzer 3000 terpasang dengan baik.
2. Atur panjang gelombang cahaya yang digunakan:
1. Kryton Laser: pada panjang gelombang 647 nm.
2. Argon Laser: pada panjang gelombang 364 nm dan 488 nm.
3. RGB LEDs: transmission mode.
3. Pasang 3 buah kamera CCD
4. Atur kondisi ruangan pada suhu 37 ^oC dengan kelembaban 65%     
5. Masukkan obat yang akan diuji kedalam alat
6. Atur waktu scanning selama 2,5 menit dengan panjang gelombang 420-720 nm
7. Sampel yang terlacak akan terbaca pada translocation assay yan dilengkapi dengan Windows 2000
8. Output data diprint out lalu analisa sebgai data skrining obat baru tingkat seluler.